光學(xué)顯微鏡在使用前需要進(jìn)行一系列的技術(shù)調(diào)節(jié),以確保獲得清晰、準(zhǔn)確的觀察效果。以下是一些主要的技術(shù)調(diào)節(jié)步驟:
樣本放置與固定:將樣本放置在顯微鏡的載物臺(tái)上,并使用固定裝置將其穩(wěn)定。這樣可以防止樣本在觀察過程中移動(dòng),影響觀察效果。
粗調(diào)焦:通過轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)焦輪來移動(dòng)目標(biāo)鏡頭(即物鏡)與樣本之間的距離。開始時(shí),將目標(biāo)鏡頭迅速向下移動(dòng)到Z低位置,然后慢慢地抬起目標(biāo)鏡頭,直到看到一個(gè)模糊但可見的圖像出現(xiàn)在視野中。這表明已經(jīng)接近了正確的聚焦點(diǎn)。
細(xì)調(diào)焦:在細(xì)調(diào)焦輪上進(jìn)行微小旋轉(zhuǎn)以進(jìn)一步改善圖像清晰度。細(xì)致地調(diào)整直至達(dá)到所需清晰度為止。
調(diào)節(jié)光源:轉(zhuǎn)動(dòng)光源調(diào)節(jié)旋鈕,調(diào)整光源的亮度,使視野中的光線適中,既不過亮也不過暗。同時(shí),根據(jù)需要選擇合適的濾光片,以調(diào)節(jié)光線的顏色和強(qiáng)度。
調(diào)節(jié)聚光鏡:轉(zhuǎn)動(dòng)聚光鏡的調(diào)節(jié)環(huán),使聚光鏡與物鏡相匹配,以獲得Z佳的光線聚焦效果。如果看到的不是一個(gè)邊緣清楚的多邊形,則說明光路中的聚光鏡上下位置不準(zhǔn)確,此時(shí)需要轉(zhuǎn)動(dòng)聚光鏡的上下調(diào)節(jié)旋鈕,使聚光鏡緩慢上升或下降,直到視場(chǎng)中形成一個(gè)邊緣清晰的多邊形。
對(duì)中調(diào)節(jié):如果多邊形不在視野的中心,說明光路有偏移,需要調(diào)節(jié)聚光器對(duì)中螺釘,即兩個(gè)銀色的旋鈕,使多邊形在視野的中心。然后將視場(chǎng)光闌慢慢放大,當(dāng)多邊形正好外切于視場(chǎng)的時(shí)候就是視場(chǎng)光闌的Z佳工作位置。這樣聚光鏡的光軸就調(diào)到了與照明光路以及成像光路的光軸合軸。
選擇合適的物鏡和目鏡:根據(jù)需要選擇合適的物鏡和目鏡。物鏡和目鏡是光學(xué)顯微鏡中的兩個(gè)關(guān)鍵部件,合理選擇具有較高數(shù)值孔徑的物鏡和目鏡可以提高分辨率。
此外,在使用光學(xué)顯微鏡時(shí)還需要注意以下幾點(diǎn):
保持顯微鏡的清潔,及時(shí)清理樣本、載玻片和任何其他可能影響圖像質(zhì)量的因素。
避免手部不必要地接觸顯微鏡或工作臺(tái)面等導(dǎo)致震動(dòng)。
根據(jù)需要提高光源的質(zhì)量和強(qiáng)度,如使用激光器等高質(zhì)量光源。
采用抗散射技術(shù)減少散射現(xiàn)象,提高分辨率。
通過以上技術(shù)調(diào)節(jié)和注意事項(xiàng),可以確保光學(xué)顯微鏡獲得清晰、準(zhǔn)確的觀察效果。